Det finns många sätt att mäta bakterietillväxt, och det ena sättet är mer komplicerat än det andra. Även om måttkonsistensen ibland måste ignoreras, räcker det enklaste sättet för att mäta bakterietillväxten exakt så den används ofta. De vanligaste metoderna är att övervaka och räkna bakterier, mäta torr eller våt massa och mäta grumlighet/grumlighet. Din skols labb bör ha de verktyg och utrustning som behövs för att utföra minst ett av dessa experiment.
Steg
Metod 1 av 3: Monitoring Bacteria Live
Steg 1. Förbered ingredienserna
Det finns många specialverktyg som måste förberedas och kanske inte finns tillgängliga i ett biologilaboratorium. Förbered all utrustning och behållare innan du kör experimentet så att det inte blir krångel under processen. Du måste känna till varje ingrediens som används direkt och de grundläggande termerna i detta experiment.
- Förbered räknekammaren. Den har en inbyggd kammare, mikroskopglas och mikroskop så det är enkelt att installera och använda. Du kan köpa den från ett labb eller skolutrustning. Detta verktyg bör ha instruktioner som vägleder dig genom hela processen.
- Förbered en hällkopp eller påläggskopp. Båda dessa behållare gör att du kan övervaka bakterierna inuti.
- Kultur är en term som används för att beskriva tillväxt av organismer i ett experiment.
- Buljong är ett flytande medium där kulturen växer.
Steg 2. Använd hällplattan eller spridningsplåtmetoden
Du kan också placera bakterierna direkt på skålen för visning med hjälp av ett mikroskop. Häll kulturen på ett fat och lägg det under mikroskopet. Övervaka antalet närvarande bakterieceller.
Steg 3. Se till att koncentrationsdosen är rätt
Om det är för många kommer bakterierna att staplas upp på varandra och du kan räkna fel. Späd ut kulturen genom att blanda i mer buljong. Om det är för få blir beräkningsresultaten inte korrekta. Sila buljongen med ett filtreringssystem.
Steg 4. Räkna bakterier
Det sista steget är att räkna bakterierna en efter en. Titta igenom förstoringslinsen i räknekammaren och skriv ner antalet bakterier du ser. Jämför resultaten med resultaten från andra tester.
Metod 2 av 3: Mätning av torr och våt massa
Steg 1. Se till att du har rätt utrustning
Denna metod använder dyr utrustning och mycket tid. Om ditt labb inte har den utrustning du behöver är det en bra idé att använda en annan metod. Men om ditt laboratorium är tillräckligt välutrustat rekommenderar vi denna metod eftersom den ger mer konsekventa resultat. I denna metod behöver du:
- Hydraulisk gravitationskonvektionsugn
- Vågbehållare av aluminium
- En uppsättning kolvar (laboratorieflaskor)
- Centrifugalmaskin (centrifug) eller laboratoriefiltreringssystem
Steg 2. Se till att kulturen är i kolven
Lägg kulturen till pumpan. I detta skede bör kulturen vara en buljong, även om den senare kommer att separeras igen.
Steg 3. Torka aluminiumvågbehållaren i laboratorieugnen
Istället kan du använda ett filtermembran av cellulosaacetat med en diameter på 47 mm och en porstorlek på 0,45 µm. Oavsett vilken vägningsbehållare du använder, väg den eftersom den kommer att behöva dras av senare när du väger bakterieceller.
Steg 4. Rör om kulturen i kolven tills den är jämnt blandad
Cellen sjunker naturligt på grund av gravitationen och måste omröras för att spridas jämnt i kolven. På så sätt kan du ha fler prover.
Steg 5. Använd en centrifug för att separera bakteriecellerna från buljongen
Detta verktyg roterar kolven och ekvilibreras snabbt så att det tömmer buljongen och lämnar kulturen i kolven.
Steg 6. Skrapa bort pastan på pumpan och lägg den i en vägningsbehållare
Kasta buljongen eftersom du inte behöver den längre. Bli dock inte av med pumpan ännu, för den kommer fortfarande att användas.
Steg 7. Skölj centrifugalmaskinen och häll sköljvattnet i behållaren
Släpp sköljvattnet i kolven på bakteriecellerna för att få den våta vikten.
Steg 8. Hitta torrvikten
För att mäta torrvikt, placera behållaren i ugnen och torka vid 100ºC i 6-24 timmar enligt instruktionerna från ugnen och/eller den använda vägningsbehållaren. Se till att temperaturen inte är för hög så att bakterierna inte brinner. Väg bakterierna när de är färdiga, och glöm inte att minska resultatet med vikten på behållaren.
Metod 3 av 3: Mätning av grumlighet
Steg 1. Förbered nödvändig utrustning
Du behöver en ljuskälla och en spektrofotometer. Båda kan erhållas i laboratorieförsäljningsbutiker. Spektrofotometern bör ha instruktioner som hjälper dig att använda instrumentet enligt den modell du har. Priset på spektrofotometern är ganska överkomligt och lätt att använda så att det kan bli en av de mest använda metoderna för att mäta bakterietillväxt.
Steg 2. Tänd provet
Enligt Laymans term är grumlighet nivån av grumlighet hos ett prov. Du måste få turbiditetsmätningsnumret, som mäts i NTU (Nephelometric Turbidity Unit). Detta verktyg måste kalibreras innan det kan mäta provet exakt.
Steg 3. Anteckna resultaten
Grumlighet påverkas av antalet bakterier i provet. Spektrofotometern kommer också att berätta andelen överföring (%T). Denna siffra kommer att öka om grumligheten minskar. Jämför resultaten med resultaten från andra tester för att mäta bakterietillväxt.
Varning
- Eftersom du har att göra med en bakteriekoloni, vidta försiktighetsåtgärder genom att bära skyddsutrustning som skyddsglasögon och handskar. Det är också en bra idé att bära en mask, särskilt om du inte vet vilken typ av bakterier som studeras.
- Vidta försiktighetsåtgärder innan du hanterar någon typ av bakterier, även den ofarliga typen. Se till att alla öppna sår på din kropp är helt täckta innan du börjar.
