Pipetter är laboratorieutrustning som används för att mäta och överföra mycket små volymer vätskor. Noggrannhet i pipettmätningar är mycket viktig eftersom skillnader i volymen som tappas av pipetten kan påverka de experimentella resultaten. För att säkerställa noggrannhet är det viktigt att kontrollera pipettkalibreringen var några månader. Kalibreringsprocessen är användbar för att kontrollera om denna utrustning droppar vätska i rätt volym, så att reparationer kan utföras om det behövs.
Steg
Del 1 av 2: Kontroll av kalibrering
Steg 1. Samla de nödvändiga materialen
För att kontrollera pipettens kalibrering behövs en pipett, pipettspetsar, destillerat vatten, bägare, termometer, balans och vågkopp. Balansen som används måste vara i mikrogram för att kalibrera mikropipetten med ett maximivärde på 1 L.
- Du behöver inte mer än 5 ml vatten. Fyll bägaren med vatten.
- Se till att pipettspetsen är korrekt och passar tätt in i pipetten.
Steg 2. Mät temperaturen på det destillerade vattnet
Sätt termometern i vattnet och låt den sitta i minst en minut. Om termometerns röda linje fortfarande rör sig, vänta ytterligare en minut. Efter en minut, registrera temperaturen. Ta termometern och torka den när du är klar.
Vattentemperaturen är viktig att veta, eftersom den kommer att användas för beräkningar som utförs för att kontrollera kalibrering
Steg 3. Placera vägningskoppen på balansen och nollställ balansen
Helst har den använda balansen en dörr och ett isolerat utrymme inuti. Placera vägningskoppen i balanskammaren och stäng luckan. Om din balans inte har en skåp och en dörr, lägg bara en vågkopp på balansen. Tryck på “Zero” eller “Tare” -knappen och vänta tills skalan visar noll.
Nollställning av vågen minskar vikten av plastkoppen och låter dig bara väga vikten av ämnet som placeras i koppen
Steg 4. Förbered pipetten för kalibrering
Torka av pipetten med etanol innan du börjar och se till att ingenting täpper till pipettspetsen. Fäst rätt pipettspets på pipettspetsen och bestäm volymen som ska testas.
För kalibrering, testa de minsta och största volymerna som kan tas bort från pipetten
Steg 5. Tvätta pipettspetsen innan du kalibrerar den
Tryck på knappen till den första gränsen och doppa pipettspetsen i det destillerade vattnet till ett djup av cirka 2 mm. Släpp knappen för att absorbera en del av vätskan och släpp sedan vätskan igen genom att trycka på knappen. Upprepa detta steg tre gånger för att tvätta droppspetsarna före användning.
Tryck på knappen till den andra gränsen för att ta bort den kvarvarande vätskan på pipettspetsen och ta sedan ur pipetten ur vattnet
Steg 6. Sug upp kalibreringsvolymen
Med pipettspetsen placerad utanför destillerat vatten, tryck på knappen till den första gränsen. Doppa pipettspetsen 2 mm djupt i destillerat vatten och släpp knappen för att suga in vätskan i pipettspetsen. Vänta cirka 1 sekund innan du tar bort droppspetsen från vattnet.
Se till att pipettspetsen är helt nedsänkt under aspirationsprocessen. Det ska inte finnas några bubblor i droppspetsen eller resultatet kan bli fel
Steg 7. Häll vätskan i vägningsformen på balansen
Placera pipettspetsen på botten av vägningskoppen och tryck sedan på pipettknappen till den första gränsen. Flytta till en annan punkt, lite bort från vattnet, tryck sedan på knappen till den andra gränsen. Håll knappen intryckt och lyft pipettspetsen från vägningskoppen.
Håll spetsen fäst vid pipetten eftersom du kommer att använda den igen för några andra kalibreringstester
Steg 8. Anteckna vikten som visas på balansen
Stäng luckan till balansen om du använder en dörrbalans. Vänta tills siffrorna inte ändras längre. Skriv i din anteckningsbok.
Det är viktigt att vänta tills siffrorna på skalan inte ändras igen innan du skriver ner dem. Anteckningar kommer att gå fel om du inte väntar
Steg 9. Upprepa denna process för att utföra läsningen minst 10 gånger
Nollställ vågen igen, tvätta pipettspetsarna före användning, sug samma volym vätska, ta bort volymen och registrera sedan vikten. Anteckna vikten av destillerat vatten för samma volym och genomsnitt sedan alla dina anteckningar.
Du kan upprepa denna process för olika volymer om varje volym testas flera gånger
Del 2 av 2: Beräkning av kalibreringsresultat
Steg 1. Definiera formeln för den beräknade volymen
Formeln för att beräkna volymen vätska som matas ut av pipetten är V = w * Z, w är vattnets vikt, Z är omvandlingsfaktorn baserad på vattnets densitet, medan V är volymen av vattenmängden tog bort.
- Variabel Z kan erhållas genom att beräkna densiteten för vatten med hjälp av temperaturen som registrerades i början av experimentet.
- Till exempel: Om vattentemperaturen är 23 ° C är Z -värdet 1.0035 g/mg.
Steg 2. Beräkna det totala genomsnittet för pipettkalibreringarna
Mängden vatten som släpps ut av pipetten har vägts minst tio gånger. För att genomsnittliga alla dessa värden, lägg till dem alla och dela med 10. Om du gjorde mer eller mindre av processen, lägg till de övergripande resultaten och dividera sedan med antalet utförda försök.
- Till exempel: Vikten av vatten från de 10 experiment som du utförde med 10µL pipetten är följande: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 och 9, 98.
- Medelvärdet är: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9 984
Steg 3. Anslut variablerna till ekvationen och lös
När du har bestämt rätt antal för varje variabel ansluter du det till formeln och slutför den beräknade volymen. För att lösa denna ekvation, multiplicera helt enkelt genomsnittsvikten för alla försök med Z -värdet.
Till exempel: V = w * Z = 9 984 * 1.0035 = 10, 019
Steg 4. Beräkna pipettens noggrannhet
Använd ekvationen A = 100 x Vsnitt/V0 för att beräkna pipettens noggrannhet. A anger pipettnoggrannhet, Vsnitt är den beräknade medelvolymen och V0 är det värde som anges på pipetten. Noggrannhetsvärdet bör ligga mellan 99-101%.
- Om pipetten är korrekt kalibrerad bör det beräknade värdet vara mycket nära det faktiska värdet som anges på pipetten.
- Till exempel: A = 100 x Vsnitt/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Denna pipett är korrekt kalibrerad.
Steg 5. Skicka pipetten vid behov för kalibrering
Om din pipett inte klarar kalibreringstestet, använd den inte för experiment just nu. Pipetter är mycket ömtålig och dyr laboratorieutrustning. Du kan inte fixa kalibreringen själv, pipetten måste skickas in för reparation. Alternativt kommer flera företag att komma till ditt laboratorium och kalibrera pipetten på plats.
